雌蕊相对于WT明显增粗

2025-06-15 17:42:36来源:分类:时尚趋势

1.7RNA抽提和基因表达分析

抽提拟南芥生长20d的白菜叶片RNA进行RT-PCR的基因表达量检测。RNA抽提、型油性状析分反转录和RT-PCR等程序详见Fan等的菜s传分方法BrCLV3和内参基因18SrRNA的表达检测引物对分别为DXP109/DXP129和18SrRNAF/R,序列详见表1。多室的遗

2 结果与分析

2.1 多室白菜型油菜srb的鉴定角果形态分析

对多室白菜型油菜srb的花器官和角果变异进行观察和分析发现,其花器官数目变异与多室黄籽沙逊ml4类似,即:花萼和花瓣等花器官数目正常;雄蕊数目基本正常,但在极少数花中可以观察到7个(图1-a~j);雌蕊相对于WT明显增粗。白菜srb的型油性状析分角果多室性状遗传稳定,单株多室角果比例94.7%~100.0%,菜s传分平均为97.9%,多室的遗每角果具有3~4个心皮(平均3.5个心皮)。鉴定多室角果平均长、白菜宽和厚分别为37.0、型油性状析分6.4和3.8mm;较两室角果显得短而粗。菜s传分

对子房进行石蜡切片观察,多室的遗WT材料的鉴定子房为两室,是由2个心皮相对发育成一个完整的假隔膜,将心皮分割成2个腔室,假隔膜两侧分别着生1列种子;srb的三室子房则由3个心皮向中间发育形成“Y”字型假隔膜,将角果分割成3个腔室,假隔膜上着生3列种子,果皮分为3瓣(图1-x);在srb和ml4的四心皮子房内,2个近乎平行排列的假隔膜将子房内腔分隔成3个腔室,中间的腔室比两侧的腔室大,中间的腔室着生2排胚珠,而两侧的腔室各着生1排胚珠,其假隔膜的横切面呈“Ⅱ”型(图1-y)。

2.2 白菜型油菜srb多室性状的遗传分析

为确定srb中多室性状的遗传规律,将其与两室白菜型油菜WT进行正反交,F1单株全部表现为两室,表明srb中的多室性状由隐性核基因控制,且无细胞质效应(表2)。在F2分离群体中,两室表型单株(78株)与多室表型单株(23株)符合3∶1的分离比(χ2=0.27,P>0.05)。表明srb中的多室性状受1对隐性核基因控制。

为确定srb中的多室基因是否与我们前期克隆的多室基因Brclv3相同,进一步将srb与ml4进行等位测验发现,它们的正反交F1和F2分离群体的所有单株全部表现为多室(表2)。表明srb中的多室基因与ml4中的多室基因等位,因此它们的多室性状可能均由BrCLV3基因的突变所导致。

2.3 白菜型油菜srb中多室候选基因BrCLV3的克隆与序列分析

我们对srb中的BrCLV3等位基因的编码区、2.3kb的启动子区和2.5kb的3'端侧翼序列进行比较测序。与WT中的BrCLV3序列比对分析,共发现3处碱基序列变异(图2-a)。其中,位于3'端的SNP差异和第2个内含子中ATAT插入/缺失差异都不会引起该基因蛋白序列的改变,而位于第3个外显子中的C/G单核苷酸突变可导致编码蛋白的1个氨基酸替换。进一步比较ml4、srb和Chiifu-401(已发表基因组序列的白菜,两室表型)之间的氨基酸序列差异发现,该突变氨基酸位于CLEmotif的第12位,由组氨酸突变成天冬氨酸,将其命名为Brclv3Asp12;它与前期在ml4中发现的CLEmotif上的碱基变异不同,因此Brclv3Asp12是一个新的等位突变,可引起CLV3多肽信号的序列突变(图2-b)。在拟南芥中,CLEmotif是CLV3多肽信号分子的重要功能域,由12个保守的氨基酸组成,其中第12位组氨酸对于维持茎顶端分生组织的大小至关重要。因此,本研究新发现的第12位His-to-Asp氨基酸替换可能影响BrCLV3基因的正常功能发挥,从而影响角果的正常发育。

2.4 Brclv3Asp12等位基因特异的SNP标记在分离群体中的表型共分离验证

针对Brclv3Asp12中的C/G单核苷酸变异开发了特异性的SNP标记,并对srb×WT杂交产生的F2分离群体进行了BrCLV3基因型的鉴定。结果表明,BrCLV3纯合基因型(AA)单株都为两室角果表型,Brclv3Asp12纯合基因型单株(aa)都为多室角果表型,杂合基因型单株(Aa)表现为两室或近乎两室角果表型(图3);3种基因型单株的比例(AA∶Aa∶aa)符合1∶2∶1的分离比(χ2=0.80,P>0.05)。该结果证实Brclv3Asp12中的C/G变异与多室表型共分离,表明该SNP变异可能是引起srb中多室角果产生的原因。

声明:本文所用图片、文字来源《作物学报》,版权归原作者所有。如涉及作品内容、版权等问题,请与本网联系

相关链接:油菜甾醇,油菜花粉,表油菜素内酯琼脂糖

更多资讯请点击:时尚趋势

推荐资讯

四川省《玻璃工业大气污染物排放标准》解读来了,经验交流

近日,生态环境厅联合省市场监督管理局发布《玻璃工业大气污染物排放标准》,自2024年10月1日起实施。该标准制定的原则是什么?适用哪些范围?一起来看。一、玻璃工业大气污染物排放标准制定的必要性和背景是

山东青岛建立中国北方茶产业第一个“国字号”平台

中国消费者报济南讯记者尹训银)为深入贯彻《国家标准化发展纲要》、更好发挥标准化工作对乡村振兴的技术支撑作用,近日,山东省青岛市市场监管局、青岛市农业农村局联合在崂山区召开全市乡村振兴标准化工作会议,同

两上市公司签光伏发电项目 光伏业复苏迹象明显 ,行业资讯

光伏行业今年以来复苏迹象明显,两家上市公司拓展光伏业务方面又有了新动作。其中海润光伏签订13.5亿元分布式光伏发电项目;华北高速则与相关企业签署光伏电站开发运营合作意向书。海润光伏9月17日晚间公告,